HPLC高效液相色譜儀也叫高壓液相色譜、高速液相色譜、高分離度液相色譜等，它是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動相，故又稱高壓液相色譜。又因分析速度快而稱為高速液相色譜。
HPLC高效液相色譜儀的儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相，被流動相載入色譜柱內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，因此在兩相中作相對運動時，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
HPLC高效液相色譜器一般由溶劑輸送系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)（色譜柱）、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理與記錄系統(tǒng)組成，具體包括儲液器、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀或數(shù)據(jù)工作站等幾部分。其中輸液泵、色譜柱和檢測器是HPLC高效液相色譜儀的關(guān)鍵部分。
1、溶劑輸送系統(tǒng)
①儲液器：用來貯存數(shù)量足夠、符合要求的流動相。配有溶劑過濾器，以防止流動相中的顆粒進(jìn)入泵內(nèi)。
②脫氣器：脫氣的目的是為了防止流動相從色譜柱內(nèi)流出時釋放出氣泡進(jìn)入檢測器，從而引起噪聲，不能正常檢測。
③輸液泵：將儲液器中的流動相連續(xù)不斷地以高壓形式進(jìn)入液路系統(tǒng)，使樣品在色譜柱中完成分離過程。
④梯度洗脫裝置：是在分離過程中通過逐漸改變流動相的組成增加洗脫能力的一種裝置。
2、進(jìn)樣系統(tǒng)
進(jìn)樣器：是將樣品送入色譜柱的裝置，進(jìn)樣方式可以分為兩種：閥進(jìn)樣或自動進(jìn)樣。比較常用的是采用自動進(jìn)樣器裝樣。
3、分離系統(tǒng)
色譜柱：對樣品進(jìn)行分離，是整個色譜系統(tǒng)的心臟，它的質(zhì)量優(yōu)劣直接影響到分離的效果。
4、檢測系統(tǒng)
檢測器：將色譜柱連續(xù)流出的樣品組分轉(zhuǎn)變成易于測量的電信號，被數(shù)據(jù)系統(tǒng)接收，得到樣品分離的色譜圖。
5、數(shù)據(jù)處理和記錄系統(tǒng)
對色譜數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，并參與HPLC高效液相色譜儀器的自動控制。
